白蛋白融合蛋白

白蛋白融合蛋白（rHSA Fusion Proteins）是將目的蛋白與白蛋白進(jìn)行融合表達(dá)的蛋白質(zhì)，可延長(zhǎng)目的蛋白在體內(nèi)的半衰期，在生物醫(yī)藥領(lǐng)域中具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。早在1992年，歐洲科學(xué)家就嘗試將白蛋白和CD4蛋白基因融合后在酵母體系中表達(dá)，用于HIV的治療。2014年，GSK公司推出一種GLP-1受體激動(dòng)劑阿必魯肽（Albiglutide），用于治療2型糖尿病，該藥物是將兩個(gè)GLP-1串聯(lián)后與rHSA融合，具有長(zhǎng)效性，僅需每1-2周注射一次，可有效幫助患者管理其血糖水平。2016年，CSL Bering公司Idelvion經(jīng)FDA批準(zhǔn)上市，該產(chǎn)品是凝血因子IX和rHSA的融合蛋白，在血液中半衰期更長(zhǎng)，用于治療B型血友病。此外，還有很多其他類型的白蛋白融合蛋白正處于臨床試驗(yàn)階段，例如，生長(zhǎng)因子-rHSA融合蛋白、白介素2-rHSA融合蛋白、抗體片段-rHSA融合蛋白（如scFv-rHSA融合蛋白）、干擾素α-2b-rHSA融合蛋白等。

AlbuPure®層析填料

AlbuPure®是Astrea Bioseparations和Albumedix公司合作開發(fā)的白蛋白親和層析填料，填料基架是粒徑均一的高交聯(lián)瓊脂糖，配基是合成的三嗪化合物，具體高流速、高動(dòng)態(tài)結(jié)合載量、強(qiáng)化學(xué)耐受性等特點(diǎn)，主要用于白蛋白融合蛋白的純化。AlbuPure®的性能參數(shù)如下表所示。

AlbuPure®具有卓越的白蛋白融合蛋白結(jié)合性能，如圖4所示，研究人員在不同pH值不同流速的上樣條件下，探究了AlbuPure®對(duì)scFv-rHSA的動(dòng)態(tài)結(jié)合載量，結(jié)果表明，在pH=4.5，240cm/h線性流速下，AlbuPure®對(duì)目標(biāo)融合蛋白的動(dòng)態(tài)結(jié)合載量最佳，10%流穿時(shí)，載量高達(dá)38.4mg/mL。

圖4. AlbuPure®動(dòng)態(tài)結(jié)合載量研究

與Mimetic Blue® SA HL P6XL類似，AlbuPure®親和層析填料也具有優(yōu)秀的化學(xué)穩(wěn)定性，可耐受1M NaOH溶液的清潔，對(duì)常見的變性劑、表面活性劑、還原劑等兼容性良好。

在一項(xiàng)研究測(cè)試中，研究人員使用酵母體系表達(dá)Anti-HIV gp41-rHSA融合蛋白（72kDa），收獲液經(jīng)澄清后，上樣到裝有AlbuPure®的層析柱中，層析工藝參數(shù)如下表所示：

由圖5的層析圖譜和圖6的SDS-PAGE檢測(cè)結(jié)果可知，AlbuPure®可以高效捕獲Anti-HIV gp41-rHSA融合蛋白，雜質(zhì)蛋白在上樣時(shí)流穿，經(jīng)過(guò)三次不同pH值下的淋洗步驟，可進(jìn)一步去除少量掛柱的雜質(zhì)蛋白，目標(biāo)融合蛋白最后由辛酸鈉洗脫下柱，純度極高。

圖5. AlbuPure®純化Anti-HIV gp41-rHSA融合蛋白的層析圖譜

圖6. SDS-PAGE檢測(cè)結(jié)果

Lane: 1. Load (diluted); Lane 2: FT (neat); Lane 3: post load wash (neat); Lane 4: wash 1 (neat); Lane 5: wash 2 (neat); Lane 6: wash 3 (neat); Lane 7: elution (diluted); Lane 8: elution (10 fold dilution of lane 7); Lane 9: human albumin standard (1μg)

AlbuPure®訂購(gòu)信息

散裝填料

預(yù)裝柱

如您對(duì)上述產(chǎn)品感興趣，歡迎點(diǎn)擊這里填寫信息，Astrea Bioseparations技術(shù)專家將為您提供個(gè)性化優(yōu)化方案，切實(shí)幫您解決純化工藝中的疑難問題。

Astrea Bioseparations于1987年孵化自劍橋大學(xué)，擁有超過(guò)30年層析介質(zhì)研發(fā)和生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)，是世界級(jí)層析介質(zhì)產(chǎn)品與服務(wù)供應(yīng)商。目前使用Astrea的產(chǎn)品已有超過(guò)21個(gè)生產(chǎn)工藝通過(guò)了FDA和EMA的批準(zhǔn)。Astrea Bioseparations在全球擁有3個(gè)研發(fā)和生產(chǎn)基地，專注為生物大分子和CGT領(lǐng)域提供行業(yè)領(lǐng)先的層析介質(zhì)和技術(shù)服務(wù)。Astrea Bioseparations推出的基于納米纖維的新型層析技術(shù)，解決了傳統(tǒng)生物分離工具載量低和工藝耗時(shí)問題，實(shí)現(xiàn)更快、更環(huán)保、更具成本效益的純化過(guò)程，完全符合當(dāng)今生物治療創(chuàng)新的需求。

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參考文獻(xiàn)

1. 人血清白蛋白融合技術(shù)在藥物長(zhǎng)效化改造中的應(yīng)用，生命科學(xué)，第27卷，第9期，2015年9月

2. R. Raoufinia et al., Overview of Albumin and Its Purification Methods, 2016

3. M. Sanches et al., AlbuCORE: an albumin-based molecular scaffold for multivalent biologics design, 2020

4. Technical User Guide:  Mimetic Blue® SA HL P6XL, Astrea Bioseparations

5. Application Note: Capture and purification of human serum albumin from human source plasma using Mimetic Blue® SA HL P6XL, Astrea Bioseparations

6. Technical User Guide: AlbuPure®, Astrea Bioseparations

7. Technical Note: Capture and purification of recombinant albumin-fusion proteins using AlbuPure®, Astrea Bioseparations